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氨解儀單管氨解與96孔板氨解方法

發布時間:2022-02-11      點擊次數:109
   氨解儀的研制是為有效制備生物樣品,用于PCR引物、探針和組分生產,DNA測序、DNA和RNA合成、隨機啟動、載體設計、DNA指紋和人工基因合成。是DNA/RNA/寡核苷酸脫保護基快捷高效穩定的解決方案。
  氨解儀單管氨解與96孔板氨解方法
  一、單管氨解
  1、將合成好的柱子用注射器針頭將CPG或樹脂粉末全部倒入氨解瓶中,并將對應的標簽貼在氨解瓶上。
  2、加入冰三乙胺100ul,冰氨水1.5ml,蓋緊瓶蓋,放入80度烘箱氨解2小時。對用快速氨解單體合成的序列直接加氨水后55度2小時即可。在生產操作表上準確記錄開始氨解的時間。
  注意事項:
 ?。?)在將引物放入氨解瓶時,要核對清楚標簽,要一一對應。
 ?。?)三乙胺與氨水順序要防止加反。(加反后會出現分層現象)
 ?。?)氨解中使用的氨水必須是冰凍狀態中的氨水。
 
  二、96孔板氨解
  1、55度氨解
  對好標簽,向合成板內加入適量的乙氰放在墊板上,重量平衡,高速離心。(對于3900,離心完后需用注射器針頭將砂芯勾出)離心完后,將墊板換成正面貼有對應輪次標簽的氨解板上。放入通風櫥。先向合成板每孔加入50ul三乙胺,再向每孔加入250ul氨水,用膠帶封好放入氨解盒中,在操作單上登記好時間和氨解人,放入55度烘箱氨解40min。
  2、80度氨解
  40min后取出,放入通風櫥趕氨1分鐘,高速離心。拿去合成板用20ul小槍取小樣20ul;在向氨解板每孔內加入冰氨水200ul,封好膠帶,用夾板夾好,登記好時間,放入80度烘箱氨解2h。
  注意事項:
 ?。?)務必在氨解板正面貼上該輪次標簽,然后再位置一一對應墊再合成板下面,一起氨解,離心。
 ?。?)三乙胺與氨水順序要防止加反。(加反后會出現分層現象)
 ?。?)氨解中使用的氨水必須是冰凍狀態中的氨水。
 ?。?)夾板密封時要注意擰緊,防止出現漏氨。

氨解儀

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